生化试剂试验步骤

生化试剂试验步骤有哪些 ：

1、贴壁细胞用胰酶消化，离心收集。

2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次，离心收集。试验步骤2再重新作一边。

3、加入5mlDNA提取缓冲液，（10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS）,混匀。

4、加入25ul蛋白酶K,使终浓度达到100ug/ml,混匀，50℃水浴3h,

5、用等体积的酚抽提一次，2500rpm离心收集水相，用等体积的（酚，异戊醇）混合物抽提一次，2500r/min离心收集水相

6、用等体积的，异戊醇抽提一次。加入等体积的5mol/L的LiCL,混匀，冰浴，10min.。

7、2500rpm离心10min.转上清于一离心管中。加入等体积的异丙醇。室温10min。2500rpm,离心10min。弃上清。

8、加入0.1倍体积3mol/L乙酸钠（PH5.2）与2倍体积-20℃预冷无水乙醇。-20℃20min。

9、12000r/min,室温离心5min。弃上清。将DNA溶于适量TE中。

（以上实验步骤可供各位老师参考.）